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So bereiten Sie Pflanzenhormonlösungen für die Gewebekultur vor

Einführung

Von den Pflanzen synthetisierte Pflanzenwachstumsregulatoren sind für ihr Wachstum und ihre Entwicklung notwendig. Aber, die gleiche Reaktion in einem Labor unter künstlichen Bedingungen zu induzieren, es erfordert die Zugabe von exogenen Pflanzenwachstumsregulatoren zu den Medien.

Heute, mehrere natürliche und synthetische Pflanzenwachstumsregulatoren (PGRs), Pflanzenhormone, oder Phytohormone stehen zur Verwendung in Gewebekulturexperimenten zur Verfügung. Aber wie man eine PGRs-Lösung vorbereitet, ist ein häufigstes Problem oder eine Verwirrung, mit denen unsere Kulturschaffenden konfrontiert sind!

So, In diesem Artikel, Wir haben behandelt, wie die Stammlösung von Pflanzenwachstumsregulatoren und die Stammlösung von NaOH (Lösungsmittel) hergestellt werden, die zum Auflösen des Hormons in Pulverform erforderlich sind.

Wie bereite ich eine Stammlösung von PGRs vor?

Um die Stammlösung eines Pflanzenwachstumsregulators herzustellen, gehen Sie wie folgt vor:

  • Nehmen Sie 50 ml Falkenröhrchen für jedes Hormon, für das Sie die Brühe vorbereiten möchten.
  • Beschriften Sie jedes Röhrchen richtig mit dem Namen des Hormons.
  • Um eine 1 mg/l Pflanzenwachstumshormon-Arbeitslösung herzustellen, 1 g/l Lösung mit Wasser herstellen.
  • In dem Video, Wir messen 0,05 Gramm (50 mg) des Hormons in Pulverform, um eine 50 ml Stammlösung herzustellen.
  • Sie können einen Becher und einen Spatel verwenden, um jeden Pflanzenwachstumsregulator zu messen. Aber, Sie sollten den Becher wechseln und den Spatel jedes Mal reinigen oder wechseln, wenn Sie einen anderen Pflanzenwachstumsregulator messen, um eine Kreuzkontamination Ihrer Stammlösungen zu vermeiden.

Hinweis:Aus einer 100-Gramm-Flasche mit Pflanzenwachstumsregulatoren von PCT Sie können 100 Liter Stammlösung herstellen. Jedoch, Sie benötigen nur 1 ml Stammlösung, um 1 Liter Medium herzustellen. So, Insgesamt können Sie 100.000 Liter Medien pro Flasche vorbereiten.

  • Der nächste Schritt ist das Auflösen der Pulverform des Wachstumsregulators. Es löst sich nicht direkt in Wasser auf, Sie brauchen also ein Lösungsmittel.
  • Verwenden Sie NaOH als Lösungsmittel, um die Pulverform des Wachstumsregulators aufzulösen.
  • Mit einer Mikropipette 1 ml NaOH abmessen und in das 50 ml Falkenröhrchen mit dem pulverisierten Wachstumsregulator geben. Mischen Sie es richtig und wechseln Sie die Pipettenspitzen, bevor Sie die nächsten Wachstumsregulatoren mischen, um eine Kreuzkontamination zwischen Hormonen zu vermeiden (wenn Sie eine Pflanzenhormon-Stammlösung aus mehr als einem Hormon herstellen).

Sie können auch den kleinen Rührer verwenden oder das Röhrchen oder die Flasche schütteln, um das pulverisierte Hormon in dem Lösungsmittel aufzulösen.

Hinweis:Das Verfahren zur Herstellung von 1 M NaOH ist unten angegeben. So, Nehmen Sie 1 ml NaOH aus der vorbereiteten 1 M Lösung, um Pflanzenwachstumsregulatoren aufzulösen.

  • Geben Sie dann 49 ml (da Sie bereits 1 ml NaOH zum Auflösen des Hormonpulvers zugegeben haben) destilliertes Wasser mit einer Pipette hinzu, um 50 ml der Stammlösung des Hormons herzustellen.
  • Dann, Es ist an der Zeit, die Stammlösung zu sterilisieren, da sie nicht steril ist. Sie sollten über Ihr Hormon Bescheid wissen, ob es hitzebeständig ist oder nicht.
  • Wenn das Hormon nicht hitzebeständig ist, Sie müssen die Lösung mit einer Spritze filtern, nachdem das Medium auf mindestens 60 Grad Celsius abgekühlt ist. Wenn es hitzebeständig ist, können Sie die Lösung autoklavieren.
  • Dann ist Ihre Stammlösung einsatzbereit für Ihr Experiment. Sie können es verdünnen, um es auf die gewünschte Konzentration zu bringen.

Wie bereite ich eine 1M NaOH-Lösung vor?

Natriumhydroxid (NaOH) wird verwendet, um den pH-Wert des Kulturmediums zu erhöhen oder die pulverförmige Form des Wachstumsregulators aufzulösen.

  • Zur Herstellung der NaOH-Stammlösung benötigen Sie NaOH-Pellets, ein Spachtel, Erlenmeyer-Kolben.
  • 100 ml destilliertes Wasser mit der Pipette in den Erlenmeyerkolben geben.
  • Um eine molare Lösung von NaOH herzustellen, benötigen Sie die Formel:

Molarität =nein. Mol gelöster Stoff / 1 Liter

Und, ein Mol Natriumhydroxid =40 Gramm

So, wenn Sie 1M NaOH-Lösung herstellen möchten, Sie benötigen 40 Gramm NaOH gelöst in 1L der Lösung.

Aber, hier bereiten wir nur 100 ml der Stammlösung vor, also dafür, Sie benötigen nur 4 Gramm NaOH gelöst in 100 ml Wasser.

  • Messen Sie 4 Gramm NaOH mit einem Spatel auf einer Waage ab.
  • Die abgemessenen NaOH-Pellets in Wasser geben und mit einem Rührgerät zu einer homogenen Lösung machen.
  • Nachdem die Pellets aufgelöst sind, Übertragen Sie die Lösung in die Vorratsflasche.
  • Ihre 1 molare NaOH-Lösung ist gebrauchsfertig für Ihre Experimente.

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