Einführung

Der Blattzauber, das Muster der Blattvariegation und Textur, und ihre Toleranz gegenüber begrenzter Sonneneinstrahlung machen die Alocasias zu einer der beliebtesten Pflanzen bei Landschaftsgärtnern und Pflanzensammlern.

Alocasia umfasst etwa 100 Arten und ist eine morphologisch vielfältige Gattung in der Familie Arecaceae. Die Mitglieder werden ausgiebig für verschiedene Zwecke verwendet. Seine Blätter, Wurzeln, und Stängel werden an einigen Stellen für essbare Zwecke verwendet, und die Pflanze Giant Taro hat viele medizinische Eigenschaften, einschließlich Antidiarrhoikum, antimykotisch, und entzündungshemmende Eigenschaften.

Die medizinischen Eigenschaften und die Schönheit der Pflanze machen sie bei den Menschen sehr beliebt. Die himmelhohe Nachfrage nach diesen Pflanzen im kommerziellen Raum hat die Wissenschaftler dazu veranlasst, eine bessere Alternative zu finden, um die Marktnachfrage zu erfüllen. Und, Gewebekulturwerkzeuge haben sich als ausgezeichnete Techniken erwiesen, um alle oben genannten Zwecke zu erfüllen.

Dieser Artikel enthält eine Beschreibung der Alocasia Gattungen und ihre Mitglieder und weiter, es führt Sie zur Gewebekultur dieser Pflanze und ihrem Verfahren.

Über Pflanze

Alocasia ist eine Gattung mit knollenförmigen, mehrjährigen Blütenpflanzenarten mit breiten Blättern und Rhizomen. Die Pflanzen werden normalerweise 2-6' hoch.

Die Blätter der Pflanzen sind langstielig, pfeilspitzen- bis herzförmig, die in verschiedenen Größen verziert und bunt geschmückt sind, von 8" bis 36" lang, je nach Sorte. Die Pflanzen werden aufgrund der Ähnlichkeit ihrer Blätter mit großen Elefantenohren allgemein als Elefantenohren bezeichnet.

Sie sind in tropischen Regenwäldern beheimatet, sekundäre Vegetationsstandorte, und entlang von Bächen oder sumpfigen Orten aus Indien, Südostasien, und Südchina über die Südpazifikinseln (insbesondere die Philippinen, Karolinen, und Indonesien) nach Ostaustralien.

Alocasia war der Höhepunkt der Mode für Gärtner, Kulturschaffende, und Pflanzensammler seit über 150 Jahren. Diese Pflanzen werden gesammelt und in großem Maßstab verkauft, um einen kommerziellen Maßstab zu erfüllen.

Die Existenz mehrerer Arten der Gattungen ist durch die kontinuierliche Sammlung und Zerstörung von Lebensräumen bedroht. Der Druck, diese Pflanzen zu schützen, kann durch die Verwendung von in vitro-Mikrovermehrungstechniken verringert werden.

Gewebekultur von Alocasia

Die Gewebekultur ist aufgrund ihres großen Potenzials für die Vermehrung hochwertiger Heilpflanzen ein unverzichtbares biotechnologisches Werkzeug in Pflanzenlabors. Herstellung hochwertiger Naturprodukte, und schnelle und Massenproduktion von Pflanzen.

Es ist die beste Alternative für die Produktion von medizinisch wichtigen Pflanzenmetaboliten, schnelle Vermehrung gefährdeter oder seltener Arten, Produktion von krankheitsfreien Pflanzen, und Pflanzen-Genom-Transformation.

Viele Unternehmen haben seit 1974 die Sprossspitzenkulturtechnik verwendet, um viele krankheitsfreie Klone von Aroiden herzustellen (Hartman).

Hier, ein Verfahren zur Gewebekultur von Alocasia longiloba unter Verwendung von Samen wurde behandelt, die der Studie von Abdulhafiz entnommen ist, F., Mohammed, EIN., Kayat, F., Zakaria, S., Hamza, Z., Reddy Pamuru, R., Hamza Z., Reduan, M.F.H. (2020). Mikrovermehrung von Alocasia longiloba Miq und vergleichende antioxidative Eigenschaften von ethanolischen Extrakten der Feldpflanze, In-vitro-vermehrter und in-vitro-abgeleiteter Kallus. Pflanzen, 9(7), 816. doi:10.3390/plants9070816

Verfahren

• Pflanzenmaterial und Samenvorbereitung:
• Sammle die Früchte von A.longoliba und waschen Sie sie unter fließendem Wasser, gefolgt von einer Spülung in sterilem destilliertem Wasser, um den Staub vollständig zu entfernen. Dann, Trennen Sie die Samen sorgfältig von Hand und trocknen Sie sie zwei Wochen lang bei Raumtemperatur.
• Keimfähigkeitstest:

• Trinken Sie einige (100 oder mehr) Samen in sterilem destilliertem Wasser für 18 h bei 25 ± 2 °C, um das Tegument aufzuweichen und die Enzymsysteme zu aktivieren.
• Tauchen Sie die Samen in 1% Tetrazolium-Lösung (pH 7,0 ± 2) und inkubieren Sie bei 45 ° C für 6 h im Dunkeln.
• Am Ende der Inkubationszeit, Waschen Sie die Samen mit sterilem destilliertem Wasser und beobachten Sie unter einem Mikroskop die Farbänderung. Dann, Berechnen Sie den Prozentsatz der Lebensfähigkeit als Anzahl gefärbter Embryonen/Gesamtzahl. der Embryonen mit 100 multipliziert.

• Samenoberflächensterilisation:

• Waschen Sie die getrockneten Samen von A. longiloba 30 min unter fließendem Leitungswasser.
• Oberflächensterilisieren Sie die Samen mit einer Konzentration von 40% Clorox (Natriumhypochlorit 5,25%) mit einigen Tropfen Tween-20.
• Schütteln Sie die Samen auf einem Orbitalschüttler bei 80 U/min für 20 Minuten.
• Waschen Sie die sterilisierten Samen mit sterilem destilliertem Wasser, um Spuren von Clorox zu entfernen, und tupfen Sie sie dann auf der sterilisierten Whatman-Filterstudie (90 mm) trocken.

• Behandlung vor der Keimung:

Um die Samenruhe zu durchbrechen und die Samenkeimung zu maximieren, Befolgen Sie das Verfahren zur Behandlung von Samen:

• Vertikutieren Sie die Samen mit 30%iger Schwefelsäure (H2SO4) für 15 Minuten und spülen Sie sie dann für 10 Minuten in destilliertem Wasser, um die Spuren der Säurelösung zu entfernen.
• Oberflächensterilisieren Sie sie 20 Minuten lang mit 40% Clorox und waschen Sie sie dann dreimal jeweils 1 Minute lang mit sterilem destilliertem Wasser.
• Kultivieren Sie die Samen auf einem Medium bestehend aus MS-Medium, ergänzt mit 30 g L−1 Saccharose, 2,78 g L−1 Gelrite ohne Pflanzenwachstumsregulator.
• Den pH-Wert auf 5,7 ± 0,2 einstellen, bevor Agar hinzugefügt wird, und dann bei 121 °C und 103 kPa für 20 Minuten autoklaviert.
• Inkubieren Sie die Kulturen bei 25 ± 2 ° C mit einer 16-h-Photoperiode, die durch kühles weißes Fluoreszenzlicht bereitgestellt wird.

• In-vitro-Sprossinduktion und -vermehrung:

• Verwenden Sie in dieser Phase die vier Wochen alten in vitro-Samen.
• Keimblatt entfernen, Hypokotyl, und die Wurzel sorgfältig.
• 2–3 cm Sprossspitze in MS-Medium, das mit Cytokinin 6-Benzylaminopurin (BAP) ergänzt ist, inokulieren, bei 3 mg L-1.

• Zur Kallusinduktion:

• Behandeln Sie die Samen mit 30% Schwefelsäure für 15 Minuten, gefolgt von einer Oberflächensterilisation mit 40% Clorox für 20 Minuten.
• Waschen Sie dann die Explantate mit sterilem destilliertem Wasser, um die Spuren von Clorox zu entfernen.
• Impfen Sie die desinfizierten Samen aseptisch in einem Gefäß mit ca. 25 ml Medium (MS-Medium ergänzt mit 3-mg L-1 IAA) zur Kallusinduktion.
• Inkubieren Sie die Kulturen bei 25 ± 2 ° C unter kaltem Fluoreszenzlicht mit einem 16/8 h Hell/Dunkel-Zyklus.

• Für die In-vitro-Bewurzelung:

• Kultivieren Sie die isolierten Triebe (2–3 cm) aus mehreren Triebkulturen in Glasgefäßen mit 20 ml MS-Medium, ergänzt mit Indol-3-Essigsäure von 0,5 mg L-1, ergänzt mit 30 g L−1 Saccharose und 8 g L−1 Agar unter 16/8 h Hell/Dunkel-Photoperiode.

• Zur Akklimatisierung:

• Nach 4 Wochen, Die gut gewachsenen, bewurzelten Pflänzchen (8–9 cm hoch) vorsichtig aus den Kulturgefäßen nehmen und mit fließendem Leitungswasser gründlich waschen.
• Dann, Spülen Sie die Wurzeln mit Wasser, um das Agarmedium zu entfernen.
• Bewahren Sie die Pflänzchen 5 Tage im Kulturraum bei einer Temperatur von 25 ± 2 °C auf, bevor Sie sie ins Gewächshaus bringen.
• Nach fünf Tagen, Pflanzen Sie die Pflänzchen in einen kleinen Plastiktopf der Größe 20 × 15 cm, der ein Erdmedium mit einer Kombination aus Muttererde und Torfmoos im Verhältnis 1:2 enthält.

Beobachten Sie Ihre Pflanze weiterhin und zeichnen Sie ihr Wachstum auf und bemerken Sie alle negativen Veränderungen, um sofortige Maßnahmen zu ergreifen, bevor Ihre Kulturen vollständig verdorben sind.

Und, Wenn dieses Protokoll für Sie funktioniert, lassen Sie es uns wissen unter [email protected].

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